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【篇一:大隐静脉曲张术后下肢深静脉血拴的预防及护理】

[摘要]下肢静脉曲张系指下肢静脉系统处于伸张、蜿蜒而曲张状态,属于下肢静脉倒流性疾病。其原因与遗传如静脉壁薄弱和静脉瓣缺陷,及长期站立工作、重体力劳动、妊娠、习惯性便秘等致浅静脉内压力升高有关。

[关键词]下肢静脉曲张护理干预

1常见的护理问题

1、1舒适的改变;

1、2局部皮肤损伤;

1、3有静脉出血的危险;

1、4知识缺乏

随着医学科学的不断发展,大隐静脉曲张术用于治疗高龄患者日益普遍,然而,大隐静脉曲张术后深静脉血栓的形成仍然威胁着患者的生命。近年来我科实施预防优于治疗的措施,通过预防治疗和护理干预,有效预防下肢深静脉血栓的形成,取得良好的效果。

2临床资料

2、1大隐静脉张高位结扎+剥离术病例214例:年龄35-79岁,平均年龄57岁,男75例,女39例,其中伴高血压15例,糖尿病10例,冠心病2例。

2、1、1高凝状态:因手术使血液成分改变,而使机体处于高凝状态。静脉壁损伤、血流缓慢和血液高凝状态是导致深静脉血栓形成的三大因素。

2、1、2静脉血流状态

静脉损伤时,静脉回流缓慢、下肢血流处于相对滞缓状态,可因内膜下层及胶原裸露而启动内源性凝血系统形成血栓,局部组织缺氧和代谢环境而致下肢深静脉血栓形成的风险增加。

2、2大隐静脉曲张术后下肢深静脉血栓的预防措施

2、2、1促进下肢静脉回流、改善活动力。

2、2、2保持合适体位:坐时双膝勿交叉过久,以免压迫腘窝,影响静脉回流,休息成卧位时抬高患肢30°-40°,以利静脉回流。并穿弹力袜、可改善且防止下肢静脉曲张、只要持之以恒、能逐步控制和改善。

2、2、3避免引起腹内压和静脉压增高的因素:保持大便通畅、避免长时间站立、肥胖者应有计划地减轻体重。

2、3术后早期活动:病人卧床期间指导其作足部伸屈和旋转活动,术后24小时鼓励病人下地行走,促进下肢静脉回流、避免深静脉血栓形成。

2、4保护患肢:活动时避免外伤引起曲张静脉破裂出血。

3护理

3、1做好心理护理

高龄患者多因精神脆弱、恐惧心理增强、疼痛耐受力下降、对病情缺乏了解、担心预后等原因,不配合治疗和护理。因此,护士应多关心患者、耐心向患者讲解病情、介绍同种病例康复的例子,消除恐惧心理、增强康复的信心。

3、2指导患者多喝水、保证足够的液体量、防止血液浓缩、进食清淡、易消化、粗纤维、富有营养的饮食,忌食高脂肪及增加血液粘稠度的食物。保持大便通畅、以减少因用力排便、腹内压增高至静脉回流受阻。

3、3长期从事重体力劳动和长期站立工作的人,最好穿弹力袜套、使浅静脉处于被压迫状态。

3、4戒烟:因吸烟能使血液黏滞度改变、血液变粘稠易淤积、口服避孕药也有类似作用,应尽量少服用。

3、5曲张静脉合并浅静脉炎的护理

3、5、1可用安普贴薄膜外敷表皮,安普贴为无菌黏贴敷料,由水胶体附着在聚氨酯背衬上,作用为消除红肿,改善局部微循环,促进炎性物质的吸收和代谢。

3、5、2湿疹和溃疡:抬高患肢给予创面湿敷

3、5、3曲张静脉破裂出血:抬高患肢和局部加压包扎止血。

向病人解释手术的目的是缓解症状、消除淤滞性并发症,恢复正常的静脉生理功能和改善外观,以便病人能做到心中有数,乐意接受手术治疗。

【篇二:浅谈低血压患者维持血液透析的护理】

摘要]目的探讨椎-基底动脉供血不足性眩晕的中医护理干预疗效和机制。方法采用针炙、健康生活方式指导及中医辨证施护。结果增强了患者体质,加速康复、预防和减少再次发作起到了良好效果。结论中医护理干预重在治病求本,辨证施护,提高了治疗椎-基底动脉供血不足性眩晕的疗效论文下载。

椎-基底动脉供血不足性眩晕,是指脑血管供血不足所致短暂局灶性脑机能障碍而以眩晕为主诉的疾病,多见于中老年人。以突然发作、反复发作为特点,严重者可合并不可逆转的脑缺血等危急征象。临床表现为眩晕、心悸、乏力、汗出、肢冷、恶心呕吐,可表现为持续性或一过性。正确的护理不仅可减轻眩晕的症状,还可减少眩晕的发作,也可以避免脑卒中的发生。我科采取中医护理干预治疗椎-基底动脉供血不足性眩晕,效果显着。现汇报如下。

1资料与方法

1、1一般资料

2011年1月至2012年11月我科收治64例椎-基底动脉供血不足性眩晕患者。其中治疗组40例,男26例,女14例,年龄60-85岁,平均年龄74岁。对照组38例,男25例,女13例,年龄60-83岁,平均年龄72、5岁。两组患者在年龄、性别、合并症及既往史经统计学处理差异无显着性(P>0、05),具有可比性。

1、2方法

对照组采取一般性护理,观察组除一般性护理外分别给予有针对性的中医护理干预。1疗程后观察效果。

1、2、1中医护理干预

1、2、1、1针炙头晕较重者可针炙百会、风池、曲池、合谷等突,每日1次,连续10天为1疗程。眩晕而昏仆不省人事者,急按人中,强刺激,并立即报告医生配合抢救;眩晕伴恶心、呕吐者,加针内关、合谷、中脘等穴。

1、2、1、2健康生活方式指导①保持一个良好的心态。②眩晕剧烈者应多卧床休息,缓解后起床或起身动作要慢,避免急剧转动头部。③环境要清静、通风、光线柔和。④禁烟酒、咖啡及浓茶。⑤冬春季节应注意保暖。⑥营养支持原则以膳食补充营养为主,选用易消化的食品,少食多餐。鼓励食疗。

2结果

表1两组疗效比较

3讨论

3、1中医认为椎-基底动脉供血不足性眩晕是以脑动脉硬化及颈椎退行性变为基础,导致小脑下动脉、迷路动脉、内耳动脉血流下降,缺血缺氧而引起。属中医“眩晕”范畴,多由虚、瘀、风、痰等多种因素致病,病机为本虚标实,即无虚不作眩。常见于老年人。中医认为,人体以阳气为本,阳气具有温煦气化,推动血行之功,阳气充足,人体机能旺盛,气机通畅,血运正常,清窍得养,机体各种生理活动就能正常运转。若病人素体阳虚,或因年老阳衰,或因各种原因如,劳累过度,纵欲过度、嗜食生冷寒凉,病后滥用抗菌素,起居失调等导致阳气耗损,阳气不足,不能温煦气化、推动血行,气机失调,从而血行不畅,清窍失养,眩晕发作。在丹参等活血化瘀基础上,饮食应扶阳补气,可用人参或党参、黄芪、炖鸡肉、羊肉汤服用,或泡水服,多食血肉有情之品;忌食生冷、辛辣、肥腻、烟酒之品。少数病例属肝肾亏虚,髓海不足者,要注意节制房事,避免过度劳累;饮食可用甲鱼、山药、枸子汤。食欲不振者,可食陈皮、砂仁、瘦肉粥,以益气健脾和胃,后施以调补。

3、2日常生活应慎起居,避风寒,防外邪,畅情志。注意劳逸结合,过劳和纵欲过度。缓解期加强体育锻炼,增强体质。有指导患者掌握眩晕发作时的应急措施,如立即卧床或扶床栏、墙等物就地坐下,闭目养神,避免走动,病情稳定下时活动时有人扶助。

3、3针炙气血亏虚者针刺足三里、三阴交、气海、脾俞等穴,以补益气血。肝肾亏虚、髓海不足者针刺肾俞、足三里、三阴交以补益肾气。

椎-基底动脉供血不足性眩晕患者根据不同的症候特点应用中医辨证护理,饮食调理,对患者加速康复、预防和减少再次以作起到了良好效果。“急则护其标,缓则护其本”是治疗该病辨证施护的核心,是具有中医特色的有效的护理措施。

【篇三:浅静脉留置针在门诊患者中的应用及护理】

[关键词]静脉留置针门诊患者护理

浅静脉留置针又称套管针,其作为头皮针的换代产品。近几年来,浅静脉留置针在国内得到逐渐推广和应用,其功能也得以逐步扩展,深受患者和医务人员的欢迎,尤其适用于婴幼儿和老年人。实践证明使用浅静脉留置针输液有保护血管的作用,其优点是操作简单,安全方便,既减少了病人由于反复穿刺而造成的痛苦,保护了静脉,又减轻了护士的工作量,减轻了护士的压力,减少了护理人员被刺伤的意外,提高了护理工作效率。现将本科室从2010年1月至8月使用浅静脉留置针输液患者的护理体会报告如下:

1资料与方法

1、1资料本组患者240人。其中婴幼儿142人,60岁以上老年人73人,其他25人。

1、2材料选择由威海洁瑞医用制品有限公司生产的246X19mm型静脉留置针。主要由肝素帽、三通管、连接管、止血夹、套管座、套管、针管组成。

1、3冲洗液0、9%生理盐水5—10mL。

1、4血管选择应选择粗直、弹性好、卧位不易受压的血管;可选择前额正中静脉、颞浅静脉、手背静脉、贵要静脉、头静脉;避免在红肿、静脉炎、以及影响血液循环的部位进行穿刺。由于静脉炎的发生率下肢明显高于上肢,应尽量不选择下肢静脉。

1、5备皮备皮过程中,动作要轻,防止刮破患儿皮肤,可先用温湿毛巾擦湿患儿毛发,对胎脂较多的患儿可先用50%酒精擦拭,去除胎脂。备皮过程中要有助手在旁边固定患儿头部及肢体。

1、6穿刺方法穿刺前检查好留置针,严格无菌操作,消毒范围直径要大于8cm。用左手固定皮肤,以右手持留置针励志网http://wWw.qqZf.cN/;进针角度20—30°刺入静脉,见回血后降低角度10—15°,将留置针继续沿血管前进3—5mm,以保证软管进入静脉,拔出针芯;再沿静脉走向将软管缓慢送人静脉,后用输液敷贴盖针眼,再用透明敷贴固定留置针。

1、7封管方法输液完毕用10mL注射器抽取5—10mL生理盐水;从肝素帽处缓缓正压注入,因生理盐水能维持细胞外液容量与渗透压与体内钠水平衡及血液循环密切相关。将生理盐水充于留置针内可防止血栓形成,且无需配液,方法简单。

2护理

2、1健康教育

置管前护士应将静脉留置针应用目的、意义及有关注意事项,并发症的预防告知患者或患者家长,让其了解有关静脉留置针有关知识。

2、2输液完毕

分离输液管与头皮针,采用正压封管。推注封管液应缓慢,有研究表明,缓慢推注堵塞率明显低于快速推注,当封管余液还剩0、5—1ml,应边推药边退针,使封管液充满留置针内,决不能快退速推药拔针,以免血管内压力瞬间大于留置针内压力,使血液回流至留置针内,形成栓子阻塞留置针。

2、3封接后留置针的启用

每次输液前要用生理盐水10mL冲管。以确认留置针内无凝血块堵塞再给药。冲管速度不宜太慢,也不能强行用液体强行冲出血管内凝血块,以免引起栓塞。

2、4留置针并发症的观察和护理

2、4、1皮下血肿

由于医护人员在操作时技术不熟练,在同一部位反复穿刺或针管不牢等因素而导致留置针穿破血管壁形成皮下血肿。如发现皮下血肿,24小时内给予冷敷,24小时后热敷或25%硫酸镁湿敷。

2、4、2液体渗漏

由于选择血管不当,进针角度过小,固定不牢,患者躁动,外套管未完全送人血管内或套管与血管壁接触面积过大,药液浓度过高或药物本身的理化因素等均可液体渗漏。如为刺激性液体渗漏,用2%普鲁卡因环形封闭。

2、4、3静脉炎

静脉炎是静脉留置针最常见且较为严重并发症,静脉炎的发生与输液种类、套管针穿刺部位操作技术有关。用热敷或2%普鲁卡因环形封闭。

2、5留管后的健康教育

对于门诊病人留管后的健康教育尤为重要,要告知患者或患儿家长,留置时间注意保持穿刺部位干燥、清洁。禁止淋浴,避免过度活动以及局部肢体受压和置管肢体下垂。预防感染、堵塞、脱管,液体渗漏等并发症。

3应用留置针的注意事项

3、1置管前护士应了解患者病情及输液时间。若输液时间≥3天者,可考虑应用留置针。向患者或患儿家长说明静脉留置针应用的目的及优点,取得患者或患儿家长的同意方可应用静脉留置针。

3、2放置有留置针的患儿,要交待家长看护好孩子。在头部放置留置针的患者,要用小毛巾将孩子的双手包好,防止患儿用手抓拽,尽量减少患儿穿刺侧侧卧,以免静脉回流障碍,增加静脉炎发生率。在肢体放置留置针的患者,要避免肢体过度活动,必要时可用托板适当固定肢体,防止导管扭曲及脱出。

3、3置管期间注意保持穿刺部位干燥、清洁,预防局部感染。

3、4使用留置针期间,有时可引起并发症。如液体渗漏、导管堵塞、导管脱出、静脉炎等。为了防止并发症的发生或出现并发症时能及时处理,建议患者每天都来医院输液。

4结论

本组病例240人,未发生严重不良反应,2例患者发生液体外渗,经局部25%硫酸镁湿敷后缓解,3例患者穿刺点疼痛,针眼发红,及时拔针后,消毒局部,2天内症状消失。静脉留置针限制7天为留置允许最长时间,最短为2天,门诊输液患者留置针的使用是可行的。院外护理有待进一步完善;同时使用留置针的操作技巧也比较完善,真正做到改善输液、方便工作、实惠患者的目的。

参考文献

[1]赵金娥,周梅荣。静脉留置针的临床运用及护理[J]。中国误诊学杂志,2008,01(8):366、

[2]梁燕,王业创,李德群。生理盐水用于静脉留置针封管液的临床观察[J]。山西护理杂志,1998,12(2):80-81、

[3]王春丹。静脉留置针在新生儿科的应用及护理[J]。吉林医学,2008,01(29)99、

【篇四:浅谈两种术式治疗急性胆源性胰腺炎疗效观察】

[摘要]目的探讨理想的急性胆源性胰腺炎临床治疗方案。方法回顾性选取我院近期62例急性胆源性胰腺炎患者临床资料,按手术方式分为开腹治疗组和腹腔镜治疗组,对比两组不同术式患者腹痛缓解时间、血清淀粉酶恢复时间、平均住院时间以及并发症发生率等指标。结果两组均成功完成手术,全部治愈,无死亡病例,内镜组在腹痛缓解时间、血淀粉酶恢复时间、平均住院时间三项指标均小于开腹组,并发症发生率明显低于开腹组,两组比较,差异均具有统计学意义(P>0、05)。结论早期采用腹腔镜手术治疗,可明显缩短患者恢复时间,明显改善预后,显着降低并发症的发生率。

[关键词]胆源性胰腺炎手术治疗疗效观察职称论文

急性胆源性胰腺炎(acutebiliarypancreatitis,ABP)是外科常见急腹症之一,近年来发病率有逐年上升趋势,该病临床特征为:起病急骤,病情变化快,并发症发生率及病死率均较高;早期手术解除胆胰管梗阻,可使病情迅速改善并可减少复发,是治疗ABP的关键,但临床上对此病的早期治疗方案,特别是手术方式的选择仍存在不同观点。本文将系统分析我院2009年2月~2012年11月收治的ABP患者的临床资料,对比开腹及腹腔镜两种手术方法在治疗胆源性胰腺炎过程中的临床效果,以期为今后临床合理治疗ABP提供借鉴,现报道如下。

1临床资料

1、1一般资料

本组病例62例,其中男29例,女33例,年龄(17~,75)岁,平均(53、5±3、6)岁;均以中上腹部痛为首发症状,并伴有不同程度的呕吐、恶心、腹胀、发热等症状。经B超和CT检查均提示胆囊和/或肝内外胆管结石,部分有肝内外胆管扩张;以上患者经明确诊断均符合中华医学会外科学会关于急性胰腺炎诊治指南中的诊断标准,其中39例有黄疸表现,全组血淀粉酶均>500U/L、尿淀粉酶均>900U/L,血清总胆红素>30mmol/L,APACHEⅡ评分≥8分者31例;主要病因包括:肝外胆管(包括胆囊、胆总管)结石47例,肝内外胆管结石7例、先天性胆总管囊肿合并急性胰腺胰腺炎3例,胆道狭窄3例。临床分型:轻症非梗阻型19例,重症非梗阻型17例,轻症梗阻型12例,重症梗阻型14例;入院时合并多器官功能障碍11例。

1、2方法

本组随机分为两组,即开腹手术组(开腹组,n=31例)和腹腔镜介入手术组(内镜组,n=31例),两组患者经积极术前准备,于平均入院24h~72h内开始手术,手术包括:胆囊切除、胆总管探查、T型管引流术、胆总管空肠Roux-en-Y吻合术、乳头括约肌切开术、胰腺被膜切开引流术、胆囊切除+胆总管切开取石(或探查)+T管引流+胰腺被膜切开减压+胰周引流术,术后继续按急性胰腺炎常规内科治疗。两组性别、年龄、病因、分型等一般资料比较,差异无统计学意义(P>0、05),具有可比性。

1、3观察指标

比较两组患者腹痛缓解时间、血淀粉酶恢复时间、平均住院时间及并发症发生率等。并发症观察主要包括:多器官功能障碍、单个脏器功能障碍、腹腔内大出血、胰瘘、胆瘘、肠瘘、腹腔脓肿、腹腔感染、肺部感染、胸水、切口感染等。

1、4统计学方法

应用SPSS17、0统计软件进行统计学分析,两组间比较采用t检验,计量资料以(x±s)表示,计数资料行χ2检验,以P0、05为差异具有统计学意义。

2结果

本组62例均手术成功全部治愈,无死亡病例,住院15~42d,平均住院28d。经术后积极治疗均痊愈,随访6个月无复发。术后并发3例肺部感染,3例胰腺假性囊肿,2例应激性溃疡,开腹组并发症6例(19、35%),内镜组2例(6、45%),内镜组并发症发生率明显低于开腹组,差异有统计学意义(P<0、05)。两组腹痛缓解时间、血淀粉酶恢复时间、平均住院时间比较,内镜组均显着小于开腹组,差异均有统计学意义(P>0、05)。见表1、

表1两组腹痛缓解时间、血淀粉酶恢复时间、住院时间比较(x±s,d)

3讨论

3、1病因与手术时机的选择

急性胰腺炎发病机制至今尚未完全阐明,有报道认为,急性胆源性胰腺炎主要发病机制是胆道结石及结石迁移过程中引起短暂的壶腹部梗阻,胆管高压,胆道感染或Oddi括约肌功能障碍,使胆汁返流入胰管,导致胰管及胰泡破裂,胰液外渗,破坏了胰液正常防御机制的结果[5]。其他如解剖学因素、胰腺自身消化、外科手术、胆道蛔虫、肝癌合并胆道出血、先天性胆总管囊肿、乳头旁憩室、十二指肠旁索带、壶腹癌等均可诱发ABP。解除梗阻、抑制胰腺分泌、控制炎症、代谢支持是治疗此病的4大关键。现代研究认为:彻底治疗ABP并防止复发的根本手段是外科手术治疗,早期手术较保守治疗具有更大的优势,但在手术时机的选择上尚存在一定的争议。有文献报道,首次发病入院即行胆道手术与复发后再行胆道手术的病人间平均住院时间及并发症发生率,差异均具有显着性意义,认为临床一般情况改善后行胆道手术是安全的。近来有较多学者认为,经过较长时间非手术治疗无效再行手术,弊端较多:(1)ABP严重程度与梗阻持续时间呈正相关,如果短时间内梗阻不解除,胰腺病变会进行性加重,病情迅速恶化,病死率高;(2)大部分患者合并胆道感染,非手术治疗难以清除感染源;(3)在ABP非手术治疗无效时施行急诊手术,不但增加手术难度,而且会增加手术后并发症的发生率。因此对于ABP确诊患者应对重要脏器进行评估,合理处理并存病,完善术前准备,积极开展早期手术治疗。

3、2两种手术方式的比较

近年来,就ABP手术方式的选择上也存有一定争议,有报道认为,内镜治疗可以避免开腹手术对已处在全身性炎症反应和多器官功能不全状态下患者的再次打击,早期内镜干预可明显缩短梗阻型ABP各项指标的恢复时间,并显着降低并发症的发生率和死亡率,本组研究也证实与开腹组相比,内镜组的腹痛缓解时间、血淀粉酶恢复正常时间、术后进食时间、平均住院时间均明显缩短,研究结果显示,早期内镜治疗有其独特的优越性,内镜治疗能够达到安全、有效、微创、迅速地解除梗阻,引流减压,能够达到分期分步的治疗目的,避免了开腹对腹腔及胰腺组织的损伤和侵袭,对患者创伤小,对腹腔干扰少,使胰腺脓肿、胰瘘、腹腔感染等并发症的发生率降低,把手术风险减小到最低。因此,早期行内镜治疗,完全可以取代常规的开腹手术治疗,尤其适合于高龄、合并有多脏器功能不全、难以耐受手术的患者,值得临床推广。励志名人名言http://www.qqzf.cn/

【篇五:DNA提取技术在法医学的应用与进展】

[摘要]DNA鉴定技术在现代法医物证检验中有着广泛的应用,其应用分子生物学的方法,对犯罪现场遗留的生物物证所含的DNA与犯罪嫌疑人的DNA样本进行比对,鉴定DNA结构是否相同,从而对生物物证是否来自于犯罪嫌疑人作出评价。不过大多犯罪现场遗留的生物样本存在着许多不利于法医提取的因素,比如腐败、变质、污染等。本文就现场DNA提取纯化技术方面来介绍当今法医学的技术进展。

[关键词]DNA提取硅珠磁珠

自从20世纪80年代DNA技术问世以来,改变了过去对生物物证的检验只能“否定”不能“认定”的历史。利用DNA鉴定技术,可以直接“认定”犯罪现场的血迹、精斑、毛发、唾液斑等生物检材是否为犯罪嫌疑人所留,从而为案件的侦破、诉讼提供有力的证据。目前,DNA鉴定技术在生物物证检验中的应用非常广泛,在伤害、强奸、交通肇事、亲子鉴定等刑事或民事案件中,现场遗留的血迹、精斑、骨骼、肌肉、毛发、唾液斑、尿斑、指(趾)甲、汗液指纹等生物物证都是DNA鉴定的常见检材,DNA鉴定结论是许多刑事案件的重要证据之一。

众所周知,要想对DNA进行鉴定,必须得到足量且纯净的DNA样本,DNA提取纯化技术是法医DNA检验的第一个步骤,也是最关键的步骤。从犯罪现场提取的血痕或精斑,或者是从嫌疑人或亲缘鉴定中提取的血液样本,这些生物检材中除了DNA外还包括许多物质,在分析DNA之前,必须将DNA同其他物质分离开来。可以说,能否成功进行DNA检验取决于能否从生物检材中获得高质量DNA。尤其对于腐败、变质、污染等各种条件下的现场生物检材,DNA的提取质量将直接关系到DNA检验的成败。

目前法医DNA实验室最常见的2种DNA提取方法是:酚-氯仿提取法、CHELEX提取法。虽然这些方法是被广泛应用于法医学检材,但是不得不承认,他们各自都有着不可避免的缺点。

酚-氯仿提取法:在DNA提取过程中,涉及到一些危险的化学物质,耗时。而且有些色素和泥土中能被醇沉的杂质不易被去除。同时,由于操作中涉及到多次转移样本,这样很容易造成DNA丢失,DNA提取率低,增加错误或污染的几率。

CHELEX提取法:该方法虽然提取DNA量较多,但对微量、污染的检材效果欠佳。而且该方法提取的DNA中常存在PCR扩增抑制物,且不宜长期保存,这些都可能使扩增效率下降或扩增失败

由此看到,虽然这些方法可以提取出较多的DNA样本,但是由于提取纯度较低,含有较多PCR抑制物,影响了接下来的扩增过程,这样也就影响了DNA的检验。所以如何能提取出较纯净的DNA显得十分的必要。在此,我想介绍两种更为有效的DNA提取纯化技术。

1以二氧化硅为基础的提取纯化法

这种方法是近几年才发展起来的高通量DNA提取纯化方法。其中最多见的就是以硅珠或硅膜为基础的提取方法。其基本原理是核酸在高浓度高离液盐例如氢氯酸胍、硫氰酸胍、碘化钠和高氯酸钠环境中,通常用的是硫氰酸胍,选择性地吸附在类似玻璃珠的硅支持物上。这些高离液盐可破坏液态水中的氢键网格,使变性的蛋白质和核酸比其在折叠或配对结构的情况下更具有热力学稳定性。由于硫氰酸胍是高性能的蛋白质变性剂,可以使蛋白质与DNA分离,在硅支持物吸附前高速离心可以将变性的蛋白质、杂质等不容物除去,吸附后漂洗可以将溶液中的PCR抑制物除去,因此提取的DNA比较纯,速度快,且不会受检材条件影响。

实验表明,0、5-1μL新鲜血液就可以提取出足以成功扩增的DNA。在不同的检材,如新鲜脑组织、皮肤、泥土上血迹、深色布血迹、火场尸体骨松质、深色布混合斑中提取的DNA均可成功扩增,不受检材种类的影响。同时,通过对CHELEX法,酚-氯仿法和二氧化硅膜法3种DNA提取法在污染严重混合斑分型中的应用效果的比较,发现二氧化硅膜纯化技术可以有效去除PCR抑制物,提取的DNA扩增效果明显优于CHELEX法和酚-氯仿法,具有较高的应用价值。

2纳米磁珠法

纳米科技是近年来国际上最为活跃的研究领域之一,取得了诸多举世瞩目的成就,尤其是在解决生物学、医学难题上展示了广阔的应用前景。磁性纳米技术是纳米技术的一个分支,对于DNA提取技术而言,磁性纳米技术将具有常规提取方法所无法比拟的独特优势,因此将磁性纳米技术应用在法医学界将有着广泛的前景。而磁珠提取法就是其中最常见的方法。磁珠的主要制作步骤是这样的:首先制备5-8nm的磁性纳米粒子,使其具有很高的磁场响应能力和超顺磁特性,能够通过改变外磁场实现纳米调控;然后利用包覆技术,对磁性纳米粒子进行包覆,为进一步修饰功能团提供载体,减少与生物组织的非特异性作用,对内部的磁性纳米粒子起到保护作用;接着利用表面化学修饰技术,连接可特异地与DNA发生作用的功能团,修饰的功能团必须具有对DNA可逆吸附的特性,从而实现控制DNA吸附、解离和减少与其它杂质非特异性吸附的目的;最后通过表面修饰和溶液中离子强度、pH等条件的控制,使每次操作均能获得准确数量DNA,保证后续检测分析的高成功率。

磁珠法提取纯化DNA的原理与硅珠相近,先利用硫氰酸胍等强烈蛋白变性剂,破坏细胞膜及核膜蛋白,释放DNA,并使核酸酶失活;然后加入磁珠通过表面的化学集团与DNA特异性吸附,而蛋白质等杂质不被吸附而留在容夜里;接着在磁场的作用下,磁性颗粒与液体分开,回收颗粒;最后再用纯水或TE洗脱吸附的DNA,在溶解液中进行DNA与磁珠的解离,将DNA重新溶出。

与其他常见提取方法比较,磁珠法有着显著的优势:1纳米材料具有小尺寸效应和表面效应,能够用于高效DNA提取,满足微量生物样本DNA提取的要求,实验表明,即使是0、5μL血仍能得到DNA分型,而同样的血量用CHELEX提取DNA优势不能得到分型,甚至当溶液中DNA含量仅为100pg时,DNA回收率仍然达到90%以上;2纳米材料表面能够进行化学修饰,从而与DNA进行特异性吸附,去除样品DNA溶液中的PCR抑制物质,如有机溶剂、去污剂、金属离子、染料等;3纳米粒子表面功能团数量可以控制,获得所提取DNA溶液的浓度信息,实现定量的要求;4磁性纳米材料可以通过特殊的合成工艺,使其具有超顺磁特性,因此能够通过仪器进行自动化操作,满足数据库建设大批量样本提取的需要,减少人为因素影响;5用时少,操作简单,适用于大多数生物检材。对于经验较少的初学者而言,按照简单的程序化操作,也能够获得满意的DNA提取结果;6价格低廉,便于广泛应用。由于纳米材料合成采用的都是低价无机和有机原料,无须特殊的仪器设备,使得最终的合成和研发成本都很便宜。

DNA鉴定技术作为法医鉴定的重要手段,它的科学性和实用性已得到广大司法部门和社会各界的一致认可和高度重视。目前运用DNA技术在刑事案件以及各种案件中进行检验已经是常用手段之一。而以上介绍的技术也只是整个鉴定技术的一环,样本的收集、STR分型等一系列步骤的每个因素都可能影响DNA分析结果。不过相信在科学技术迅猛发展的今天,国内外学者会研究出更多更灵敏,更简便,更经济的方法,来未法医学界或者更大的领域服务。

【篇六:医学生毕业论文范文辅导】

肺炎支原体(MP)是小儿呼吸道感染的常见病原之一,近年来感染率有上升趋势。社区获得性肺炎中有10%~30%是由MP感染所致,国外文献报道为9、6%~66、7%〔1〕。肺炎支原体肺炎(MPP)临床症状轻重不一,易导致多系统、多器官损害,容易误诊。本文对2005年1月—2007年1月间我科明确诊断并治愈出院的96例MPP患儿的临床资料进行分析,旨在提高对本病的诊治水平。

1资料与方法

1、1一般资料96例中男56例,女40例,4个月~1岁9例,~3岁11例,~6岁32例,>6岁44例,3岁前发病占20、8%,~6岁占33、3%,~13岁占47、9%。夏秋季发病33例,冬春季发病63例,发病高峰月份为11~1月份。

1、2临床表现发热72例(75%),其中低热13例,中度发热41例,高热18例;咳嗽89例(92、7%),喘息18例(13例为婴幼儿),胸痛19例;头痛、头晕11例;胸闷、乏力9例;惊厥6例。查体双肺呼吸音粗53例,局部呼吸音低13例,干口罗音17例,湿口罗音13例;肝大3例。

1、3辅助检查全部病例采集空腹静脉血,采用ELISA免疫荧光法检测MPIgM均阳性;外周血WBC<4、0X109/L10例,>10、0X109/L24例,(4、0~10、0)X109/L62例;测血沉40例,>20mm/h25例;测CRP40例,>5mg/ml12例;心肌酶:LDH升高14例,CK升高11例,CKMB升高16例,α羟丁酸脱氢酶升高13例;EKG检查56例,窦性心律不齐13例,室性早搏2例,STT改变5例;脑电图异常6例。

1、4X线检查双肺呈斑点状、云絮状阴影40例(41、7%);双肺网状结节改变22例(22、9%);节段性或大叶性浸润30例(31、3%);肺门影增大、增浓11例(11、5%);合并少量胸腔积液5例。

1、5肺外合并症96例中有肺外合并症30例,占31、3%。其中心肌损害16例,为肺外合并症首位,占53、3%;神经系统受累6例,表现为高热惊厥、脑电图轻中度异常;泌尿系统损害5例,一过性尿蛋白3例,一过性尿红细胞阳性2例;消化系统受累9例,表现为腹痛、吐泻;皮肤受累3例,表现为多形性斑丘疹,均在发热期出现。

1、6治疗与转归本组入院后首选阿奇霉素10mg/kg,每日1次静滴,连用5d,停药3d为一个疗程。对于轻型病例,一个疗程后改用口服(服3d停4d),连用1~2个疗程。对于大叶性肺炎病例静脉点滴2个疗程,再口服2个疗程,总疗程4周。对于严重支原体血症患儿先用红霉素25~30mg/kg静滴7~10d,再改用阿奇霉素服3d停4d用2~3周。有心肌损害、脑损害者加用VitC、VitE、辅酶Q10、果糖或能量等改善心肌细胞、脑细胞代谢,同时早期给予地塞米松0、1~0、25mg/kg静滴3~5d。结果全部病例均治愈。2~4周复查胸片76例,68例完全吸收,另外8例大部分吸收且临床症状完全消失。

2讨论

目前,MPP已成为儿科的常见病和多发病,一年四季均可发病,本组病例以秋末至冬季为发病高峰。发病年龄以学龄儿童多见,占47、9%,但婴幼儿发病也不少见,占20、8%,年龄最小4个月。MPP临床表现主要为发热伴持续性干咳,早期肺部体征少,婴幼儿可有喘息。X线表现早于体征,主要有4种改变:以支气管肺炎改变最多见,占41、7%;其次为节段性或大叶性浸润占31、3%;双肺网状结节改变22、9%,肺门影增大、增浓11例11、5%;侧位胸片发现少量胸腔积液5例,均发生于大叶性肺炎患儿,故此类患儿应注意摄侧位胸片。实验室检查,本组病例外周血白细胞正常占64、8%,血沉升高占62、5%,CRP升高占30%。本组查MPIgM全部阳性,MP抗体滴度一般在感染后1周左右开始升高,3~4周达高峰,持续4~6个月〔1〕,故对于上述临床表现及X线特征的患儿,待发病1周时常规检测MPIgM,以早期明确诊断。

MP除可引起呼吸系统感染外,也可累及其它系统如皮肤黏膜、心血管、神经系统、泌尿系统、血液系统、消化系统等。本组肺外合并症30例,占31、3%。其中心肌损害占首位,多为心肌酶升高和(或)心电图异常。根据我们的观察,MP对心肌的损害是肯定的,大多于抗炎治疗1~2周内症状消失,心电图恢复正常,心肌酶多在4周内恢复正常。6例脑损害患儿出现惊厥,脑电图轻、中度异常。本组心肌损害、脑损害多为轻型病例。MP肺炎肺外合并症的发生机制普遍认为免疫因素起主要作用,MP抗原与人体心、肺、肝、脑、肾和平滑肌组织存在部分共同抗原,当MP感染机体后可产生相应组织的自身抗体,并形成免疫复合物,引起MP感染的肺外表现。

MP是一种没有细胞壁仅有细胞膜的介于细菌与病毒之间的微生物,其蛋白质丰富,因此,应首选能干扰蛋白质合成的红霉素或阿奇霉素序贯治疗,前者血中浓度高于组织浓度,当临床持续高热,疑诊支原体血症患儿,应首选红霉治疗,控制支原体血症后则可进入序贯治疗,改用阿奇霉素静滴或口服,这样,既能控制支原体血症,又能减少红霉素对肝脏的毒性。而阿奇霉素与红霉素比较,组织中的浓度是血中的50倍,半衰期长达68h,在吞噬细胞及病变组织尤其是肺组织中浓度高且持久,用药3d即可维持较高的血药浓度,不良反应较红霉素少,对于无明显支原体血症的肺炎患儿首选阿奇霉素序贯治疗。治疗中若体温持续不退,除考虑支原体血症外,尚要注意是否合并细菌感染、肺外并发症及耐药等。对合并细菌感染者选用敏感抗生素联合治疗,对肺外合并症同时采取对症治疗。

目前认为MP肺炎是由于MP本身及其激发的免疫反应共同所致。文献报道,MP肺炎患者血清和支气管肺泡灌洗液中炎性介质增多,提示MP肺炎可出现较强烈的炎症反应,而肾上腺皮质激素具有抑制免疫炎症反应的作用。因此,对于急性期病情较重者、肺不张、肺间质纤维化、支气管扩张或有肺外并发症者,可用激素。本组2例合并脑损害和5例胸腔积液的患儿,在排除结核后,早期使用地塞米松0、1~0、25mg/kg静滴3~5d,未遗留后遗症。

[参考文献]

[1]董宗祈。小儿肺炎支原体感染的临床表现[J]。中国实用儿科杂志,1993,8(3):199200。

[2]俞善昌。有关支原体感染的几个问题[J]。中国实用儿科杂志,1993,8(3):209。

[3]高春燕,庞随军,贾鲲鹏。肺炎支原体感染肺外并发症118例[J]。实用儿科临床杂志,2005,20(4):320321。

[4]袁壮,董宗祈,胡仪吉,等。患儿肺炎支原体肺炎诊断治疗中的几个问题[J]。中国实用儿科杂志,2002,17(6):449。

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